甲状腺癌是最常见的内分泌系统恶性肿瘤，占全身恶性肿瘤的1％。主要组织学类型包括乳头状癌、滤泡性癌、未分化癌以及髓样癌，分别占整体甲状腺癌的8O％、15％、2％和4％。近年来，我国甲状腺癌的发病率呈明显上升的趋势。为了使甲状腺癌患者得刘正确诊断和及时有效治疗，需要探索新的诊断标志物和药物靶标。
甲状腺癌发病机制中，基因突变在甲状腺癌的发生过程中占有重要的地位，其中BRAF是甲状腺癌最常见的分子遗传学改变。BRAF基因编码蛋白是MAPK信号传导通路RAS→RAF→MEK→ERK中的重要激酶，15外显子的单个碱基错义突变（TA）导致翻译蛋白质位密码子的缬氨酸（Valine）被谷氨酸（Glutamate）替换，成为活化蛋白质激酶（BRAFVE）。BRAF激酶的持续活化，导致MEK(细胞外信号调节激酶)持续磷酸化，MAPK信号传导通路持续活化，影响细胞的生长和增殖。BRAFVE突变主要见于经典型PTC和微小癌，甲状腺非瘤性病变、良性肿瘤和其他类型的分化型甲状腺癌中未发现BRAF变异，因此BRAFVE可用于甲状腺癌的辅助诊断。针吸活检作为目前甲状腺肿瘤最常用的检查，对15%-20％的细胞组织难以明确性质；另一方面，针吸活检诊断明确的甲状腺癌，最终证实只有17%-5l％的准确率。因此需要新的方法提高对甲状腺癌诊断的准确性和特异性。进行BRAF基因突变可进一步提高术前细针抽吸活检（fineneedleaspiration,FNA）细胞学检查对甲状腺恶性结节的诊断率。
BRAFVE突变与甲状腺肿瘤的发生和肿瘤的失分化以及肿瘤的侵袭性有关。研究发现，BRAF基因突变与PTC甲状腺包膜外浸润及颈淋巴结转移密切相关，与性别、发病年龄、原发灶大小无关，突变可能增加PTC的侵袭性并影响预后。因此，BRAFVE突变可用于判断甲状腺癌预后及治疗指导。目前BRAF基因VE突变检测有许多种方法，如测序、Real-timePCR、焦磷酸盐测序等。我们采用DHPLC方法结合等位基因特异PCR进行BRAFVE突变检测，灵敏度可达到千分之一，可用于低含量肿瘤细胞BRAF突变的检测，如甲状腺微小癌、血液游离肿瘤DNA等。分子病理中心经过长时间科研，甲状腺微小癌的突变检出率为67%。
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